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胶体金（colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4）在复原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等效果下，金离子复原后聚组成的必定巨细的金颗粒，它由一个根底的晶核（11个金原子构成的二十面体）和围住在外的双离子层构成（内层为负离子层AuCl2-,外层是带正电荷的H+）。因为静电效果，金颗粒之间彼此排挤而悬浮成为一种安稳的胶体状况，构成带负电的疏水胶溶液，故称胶体金。胶体金具有高电子密度，能与多种生物大分子结合，已成为继荧光素、放射性同位素和酶之后，在免疫符号技术中较常用的一种非放射性示踪剂。胶体金的粒径一般在1-100nm之间，能够均匀、安稳地涣散在液体中，呈球形小颗粒或椭圆形大颗粒。胶体金颗粒最外层能够吸附很多的正离子，能够均匀涣散在溶液中。
因为胶体金外表呈负电性，能够与外表带正电荷的抗原、抗体经过静电效果进行符号。
将特异性的抗体以条带状固定在膜上（T线），胶体金符号试剂吸附在结合上（金垫），当待检抗原加到试纸条一端的样本垫上后，样本经过毛细效果向前移动，溶解结合垫上的胶体金符号试剂后彼此反响，再移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，集合在检测带上，可经过肉眼观察到显色成果。
胶体金试纸条主要由样品垫、金垫、硝酸纤维素膜（NC膜）、吸水纸4个部分所组成，从上至下顺次首尾相互联接，粘贴在PVC底板上。
a. 样品垫：检测样本滴加方位，对检测样本具有必定的过滤和缓冲效果，下降样本中离子强度或酸碱度对检测成果的搅扰。
b. 金垫：将胶体金符号抗体经过枯燥固定在玻璃纤维素膜上，是追寻抗体与抗原的反响。
c. 硝酸纤维素膜：膜上预先包被上检测线和质控线，能够与胶体金符号物发生免疫反响相结合，使胶体金在检测线发生集合，依据检测线的显色情况做判读成果。
d. 吸水垫：经过吸水效果使液体样品向上活动，带动金垫的金标抗体向上移动，从而与检测线的抗原发生反响。
在溶液中金颗粒呈圆形，边际平坦，边界非常清楚。金颗粒外表带有很多负电荷，因为静电的排挤力，使其在水中坚持安稳状况，构成胶体金。胶体金的制备办法有白磷复原法，抗坏血酸复原法，柠檬酸三钠复原法和鞣酸-柠檬酸三钠复原法。经过改动反响系统中氯金酸与复原剂的份额可得到所需不同直径的金颗粒。但前两种办法制备得到的金颗粒直径巨细不均一，现在常用后两种办法。
b. 滴加1.0%氯金酸溶液1.0ml，置于磁力拌和器中接连拌和并加热至欢腾
c. 拌和下快速参加1.0%柠檬酸三钠溶液1.8ml，此刻溶液逐步由浅黄色变成灰黑色最终变成橙赤色
制金前，玻璃器皿先用王水或铬酸溶液浸泡24h，用自来水冲刷洁净，然后顺次用清洁剂洗刷3次，自来水冲刷3次，蒸馏水冲刷3次，双蒸水冲刷3次。
有必要运用双蒸水。氯金酸溶液能够放在4℃保存1年左右，复原剂柠檬酸三钠需求现配运用。
在碱性条件下，胶体金颗粒外表带负电荷，可与抗原/抗体所带正电荷基团之间发生静电招引而结实结合，这种结合对所符号抗原/抗体的生物学活性无明显影响。环境pH和离子强度是影响胶体金与抗原/抗体吸附的根本原因，胶体金颗粒的巨细、蛋白质的分子量及浓度等也影响蛋白质的吸附。
用K2CO3或HCL溶液。原则上可选择待符号抗原/抗体等电点，也能够略偏碱。但各符号物的最适反响pH往往需求屡次实验才干确认。
将待符号抗原/抗体作一系列稀释后，参加装有胶体金的试管中，然后别离参加NaCl溶液，混匀静置数小时，对看管与参加蛋白量缺乏的管色彩会由红变蓝，而蛋白量足或超越的管坚持赤色不变，其间含蛋白量最低的一管即为安稳胶体金所有必要的最适符号量。
在电磁拌和器下降1/10体积的适宜浓度的抗原/抗体溶液加于胶体金溶液，反响一段时刻后参加BSA并调整至pH8.0，放置至室温持续反响数分钟，关闭剩余的游离胶体金，安稳胶体金符号物。
d. 离心去除未结合的抗原/抗体，各粒径的金粒子所需的离心转速与时刻均不相同。
e. 离心后去上清，将沉积用含PEG或BSA的缓冲液悬浮，康复至原体积后再离心。
将符号好的金标复合物喷涂在玻璃纤维素上，在枯燥间或烘箱中37℃将其烘干。
将硝酸纤维素膜（NC膜）贴在PVC底板上，将印模机的C、T线调整调配适宜的间隔，接着进行印模，最终将印好的膜放在枯燥间或烘箱中37℃将其烘干。
将吸水垫和制备好的金垫、样品垫裁切至适宜的宽度，与印好C、T线的硝酸纤维素膜贴在PVC板的方位。
依据检测卡卡槽的宽度，将组装好的大板裁切成必定宽度的检测条，裁切宽度均一，无压痕，无划伤。